钵水母
 
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发表于 2015.12.9 10:44:52
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(一)材料与设备
1. 0.75mol/L 柠檬酸钠,pH 7.0 (含柠檬酸)。用0.1% DEPC处理并高压灭菌。
2. 10% (w/v) N-月桂肌氨酸(N-lauroyl sarcosine)。
3. 硫氰酸胍缓冲液:用293 ml无菌去离子水,17.6ml 0.75 mol/L 柠檬酸钠,26.4ml 10% N-十二醇肌氨酸钠,在厂家药瓶内于65℃溶解250g 硫氰酸胍(不用称重)。
4. 抽提缓冲液:每5ml 硫氰酸胍缓冲液加36µl 巯基乙醇。若被提取组织含多聚苯酚,抽提缓冲液中可加入聚乙烯聚吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrolidone)(20% w/w)。
5. 氯仿/异戊醇49:1(v/v)。
6. 2 mol/L 醋酸钠,加乙酸至pH 4.0 。
7. 酸性苯酚:500g 晶体苯酚溶于500ml去离子水中,50ml每份于-20℃保存,4℃可保存一个月。
8. 异丙醇。
9. 70%和100%乙醇。
10. 2 mol/L 醋酸钾,加冰醋酸至pH 4.8。
11. 1O mol/L LiC1。
12. TNE 缓冲液:10mmol/L Tris-HC1, pH 7.5, 室温, 150mmol/L NaC1, 1 mmol/L EDTA。
13. TE 缓冲液:10mmol/L Tris-HC1, pH 7.5, 1mmol/L EDTA。
14. 研钵和研杵。
15. 液氮。
16. 离心机。
17. 玻璃Pasteur 吸量管,200℃干烤至少3小时。 |
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