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如何让细胞内的游离质粒丢失?

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    发表于 2019.6.26 08:54:26 | 显示全部楼层 |阅读模式

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    请问各路大神,我在我地衣芽孢杆菌里面转入了一个质粒,获得了卡那霉素抗性,但现在我又想使细胞失去对卡那霉素的抗性,让质粒从细胞中释放出来。但我现在无抗的LB液体培养基里面无论怎么传代,细胞始终都含有质粒,我该怎么办?有遇到这种情况吗?
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    发表于 2019.6.28 15:03:27 | 显示全部楼层
    适当升温试一试,从2度到10度都试一试,找到菌能够生长但是长得不好的温度传代,细菌丢失质粒概率会提升,不断取样涂板,用菌P验证
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    发表于 2019.6.28 15:10:47 | 显示全部楼层
    还有一个方法就是加入一些有毒化合物,让细菌生存压力增加,也可以增加细胞质粒丢失率的
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     楼主| 发表于 2019.6.29 10:49:24 | 显示全部楼层
    jiang_nan 发表于 2019.6.28 15:03
    适当升温试一试,从2度到10度都试一试,找到菌能够生长但是长得不好的温度传代,细菌丢失质粒概率会提升, ...

    好的,谢谢
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