我总结的trizol提取植物叶片RNA的方法

Miss甄

下面是我实验室师兄总结的提植物RNA的方法~分享一下欢迎切磋:lol

• 液氮研磨材料成粉末(一般液氮挥发不明显时快速研磨->加液氮->再等液氮挥发不明显时快速研磨即可)，使用液氮预冷的1ml枪头取不超过0.1g的材料粉末(枪头反面一舀起，基本就够了)送入液氮预冷的2.0ml离心管，加入1ml Trizol提取液，并用枪吹打混匀，剧烈振荡，确保粉末在接触到Trizol溶液前不冻融。
• 冰上静置5min(样多的情况下，放冰上1h应是不影响)。
• 加入0.25ml已预冷的氯仿，剧烈振荡，冰上静置5min。
• 4度，13000rpm，15min。
• 重复3,4一次。
• 取上清至已预冷的新离心管，加入2/3体积的预冷的异丙醇，温柔地混匀，冰上静置10min。
• 4度。12000rpm。10min，会看到管底有非常微量的小白片。
• 弃上清，用75%乙醇洗涤沉淀2-3次(一般会用枪通过乙醇将沉淀吹起，盖上盖子，温柔摇晃离心管以洗管壁，10000rpm 2min,继续下一次洗涤或者下一步)。
• 10000rpm，5min，收集沉淀，彻底去除75%乙醇，稍干燥后用适量RNase-free水溶解RNA(一般用30-50ul溶解)。
• 一般溶解15min后，每管取出微量用于检测后，剩余-75度保存。
• 电泳。
• NanoDrop查看浓度。
  
  

犬夜×

提了2年叶片RNA的飘过:'(

自在飞

我做的材料也是多糖材料，而且多酚含量很高，用TRIZOL法一直没有结果，求大虾给条活路。

基迪奥生物-张

多糖多酚类植物材料都不是很好提，感谢分享，让大家在试剂盒之外多一个选择。

HappyHelix

正在研究这个，学习了，谢谢大虾！

大熊

多谢分享啦~~~

基迪奥--刘倩

以前提RNA都没有跑电泳，那RNA的质量也相当好啊！

suny

谢谢

麦田守望者

没有基因组DNA去除步骤？

zhouyulu

叶片的RNA不好提啊

doctor125

不错的东东，收藏了，可以试试效果

dqg

自在飞 发表于 2015.12.8 14:14
我做的材料也是多糖材料，而且多酚含量很高，用TRIZOL法一直没有结果，求大虾给条活路。 ...

可以先用trizol提取，再用水饱和酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）抽提一下。

自在飞

dqg 发表于 2016.4.17 22:30
可以先用trizol提取，再用水饱和酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）抽提一下。

好的，我去试试，先谢谢你。

fengmingfeng89

草莓RNA太难提取了，哪位有好的方法或建议？

Wuii

fengmingfeng89 发表于 2016.4.19 15:29
草莓RNA太难提取了，哪位有好的方法或建议？

这篇博文的博客有姐妹篇。
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叶片组织，质量要好，就用invitrogen的trizol ，takara的质量可以，但没那么耗
其他材料，如果实等，一般用试剂盒，具体直接联系公司

RNA提取不好一般只有两个问题
1. 提取方法没选对
2. 跑胶

cxy

学习中。。。

cxy

学习了，谢谢

chai1986

我也是这种方法。

zhouqian2617

谢谢啦！

scyxr