查看: 1486|回复: 4

细胞核,细胞质分离操作步骤

[复制链接]

该用户从未签到

帝王蝶

Rank: 4

主题
4
奥币
1097
积分
246
注册时间
2016.1.19
在线时间
2 小时

推广达人突出贡献热心会员


发表于 2016.1.22 17:59:29 | 显示全部楼层 |阅读模式
细胞核,细胞质分离操作手册

1.      低渗缓冲液抽提细胞:
低渗缓冲液:  10Mm Tris-Cl (pH7.9,KOH调节)
                      1-5mM EDTA
                      蛋白酶抑制剂

2.      NP-40裂解分离细胞膜和外层核膜
用上述低渗缓冲液收集细胞后,加NP-40至终浓度0.5%,裂解10sec,低速离心,980g-1000g,离心10min。
此时,得到的上清为:细胞膜组分胞浆蛋白;沉淀即为细胞核。
将获得的上清12,000g离心10min,上清即为胞浆蛋白。

3.      细胞核用HPTM高效蛋白裂解液裂解即可。

备注:我认为,离心步骤应在4度进行;各个操作最好在冰上。

本帖子中包含更多资源

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册

x

评分

参与人数 2奥币 +15 收起 理由
小瑶 + 5 这内容不错,就是下载资料要奥币.
小圆 + 10 原创内容!

查看全部评分

回复

使用道具 举报

  • TA的每日心情

    昨天 16:07
  • 签到天数: 213 天

    连续签到: 1 天

    [LV.7]常住居民III

    管理员

    Rank: 15Rank: 15Rank: 15Rank: 15Rank: 15

    主题
    124
    奥币
    8142
    积分
    3029
    注册时间
    2015.11.12
    在线时间
    720 小时

    推广达人宣传达人论坛元老


    发表于 2016.1.22 18:10:19 | 显示全部楼层
    楼主 ,你可以在正文贴出内容来嘛~
    事在人为~
    回复 支持 反对

    使用道具 举报

    该用户从未签到

    帝王蝶

    Rank: 4

    主题
    4
    奥币
    1097
    积分
    246
    注册时间
    2016.1.19
    在线时间
    2 小时

    推广达人突出贡献热心会员


     楼主| 发表于 2016.1.22 18:26:32 | 显示全部楼层
    不开心,贴出来,没人贡献钱了,我不开森
    回复 支持 反对

    使用道具 举报

  • TA的每日心情
    yes!
    2019.5.28 15:04
  • 签到天数: 186 天

    连续签到: 1 天

    [LV.7]常住居民III

    版主

    Rank: 10Rank: 10Rank: 10

    主题
    13
    奥币
    1147
    积分
    425
    注册时间
    2015.12.29
    在线时间
    89 小时

    发表于 2016.1.29 16:12:55 | 显示全部楼层
    呵呵,等我赚来澳币来下载
    回复 支持 反对

    使用道具 举报

  • TA的每日心情
    吃饭
    14 小时前
  • 签到天数: 161 天

    连续签到: 2 天

    [LV.7]常住居民III

    中华鲟

    Rank: 5Rank: 5

    主题
    9
    奥币
    1337
    积分
    536
    注册时间
    2016.4.12
    在线时间
    54 小时

    发表于 2016.4.21 11:16:14 | 显示全部楼层
    适用于植物或者哪类植物?
    回复 支持 反对

    使用道具 举报

    您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

    本版积分规则

    快速回复 返回顶部 返回列表